1、三氣培養箱應由專人負責管理，操作盤上的任何開關和調節旋扭一旦固定后，不要隨意扭動，以免影響培養箱內的溫度，CO2、以及濕度的波動，同時降低培養箱的靈敏度。
2、所加入的水必須是蒸餾水或無離子水，防止礦物質儲積在培養箱的水箱內產生腐蝕作用。每年必須換一次水。經常檢查培養箱內水是否夠。
3、培養箱應定期用消毒液擦洗消毒，擱板可取出清洗消毒，防止被其它微生物污染，導致實驗失敗。
4、定期檢查培養箱超溫安全裝置，以防超溫。檢測方法：按進監測報警按扭，轉動固定螺絲，直到超溫報警裝置響，然后關閉超溫安全燈。
5、如長期不使用二氧化碳時，應將CO2開關關閉，防止CO2調節器失靈。
6、所使用的CO2必須的純凈的，否則降低CO2傳感器的靈敏度和污染CO2過濾裝置。
7、在無濕度控制的培養箱內，為保持箱內CO2的穩定，要在箱內底層放入一個盛水的容器。
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